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超微量分光光度计使用方法


超微量分光光度计
超微量分光光度计
是一种用于检测核酸、蛋白质等生物分子浓度的高精度仪器,具有样品用量少、操作便捷等优点。以下是其标准使用方法:

一、使用前准备
仪器预热
打开仪器电源,预热15-30分钟,确保仪器达到稳定工作状态。
样品准备
核酸样品需溶解于无核酸酶的水或TE缓冲液中,浓度建议控制在2-2000 ng/μL(dsDNA)范围内。
蛋白质样品需根据类型(如BSA)选择合适的缓冲液,浓度建议0.1-15 mg/mL。
样品需充分混匀,避免气泡或沉淀。
清洁检测平台
使用无尘纸或专用清洁布蘸取70%乙醇,轻轻擦拭上下检测臂表面,确保无灰尘、指纹或残留物。
二、操作步骤
空白调零
吸取1-2 μL空白溶液(与样品溶剂一致)滴加至检测平台中央。
放下上检测臂,点击“Blank”键进行空白校准,等待仪器自动完成调零。
调零完成后,用无尘纸吸去空白溶液。
样品检测
吸取1-2 μL样品滴加至检测平台同一位置。
放下上检测臂,点击“Measure”键开始检测。
仪器自动显示吸光度值(如A260、A280)、浓度及纯度比值(如A260/A280)。
记录数据后,用无尘纸吸去样品,避免交叉污染。
连续检测
若需检测多个样品,重复步骤2,每次检测前需用无尘纸清洁检测平台。
三、注意事项
样品浓度
若样品浓度超出仪器量程,需稀释后重新检测,并乘以稀释倍数计算实际浓度。
检测环境
避免强光直射或剧烈震动,确保仪器处于水平、稳定的工作台面。
维护保养
每次使用后清洁检测平台,长期不用时关闭电源。
定期校准仪器(建议每3-6个月),使用标准品验证准确性。
避免使用有机溶剂(如丙酮)清洁仪器,以防损坏光学部件。
四、结果解读
核酸纯度:A260/A280比值在1.8-2.0之间为纯度较高,低于1.8可能含蛋白质污染,高于2.0可能含RNA或酚类杂质。
蛋白质纯度:A280为蛋白质主要吸收峰,需结合其他方法(如电泳)综合判断纯度。
通过规范操作,可确保超微量分光光度计的检测精度和重复性,为科研实验提供可靠数据支持。
 
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