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蛋白纯化系统原理

蛋白纯化系统原理

蛋白纯化系统

1.分子亲和纯化
分子亲和纯化是利用目标蛋白与特定配体之间的特异性相互作用进行纯化的方法。在蛋白纯化系统中,可以通过在柱内填充具有亲和性配体的树脂来实现分子亲和纯化。当样品通过柱时,目标蛋白与配体发生结合,其他杂质蛋白被洗脱。随后,通过改变洗脱缓冲液的条件,使目标蛋白从亲和树脂上解离下来,实现纯化。
2.离子交换纯化
离子交换纯化是利用蛋白与固定带电基团之间的电荷相互作用进行纯化的方法。在蛋白纯化系统中,可以通过在柱内填充具有带电基团的离子交换树脂来实现离子交换纯化。样品通过柱时,目标蛋白与树脂表面的带电基团发生电荷相互作用,使目标蛋白被吸附在树脂上。随后,通过改变洗脱缓冲液的离子强度或pH值,使目标蛋白从离子交换树脂上解离下来,实现纯化。
3.凝胶过滤纯化
凝胶过滤纯化是利用蛋白分子的大小差异进行分离纯化的方法。在蛋白纯化系统中,可以通过在柱内填充具有特定孔径的凝胶颗粒来实现凝胶过滤纯化。样品通过柱时,目标蛋白由于其分子大小与凝胶孔径的匹配而通过,而大分子的杂质被凝胶颗粒阻滞在柱中,从而实现纯化。

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